UniversitÓ degli Studi di Pavia - FacoltÓ di Scienze MMFFNN

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Tecniche biomolecolari e genetiche

Corsi di laurea:
Scienze biologiche
Docenti:
Ferretti Luca
Anno accademico:
2009/2010
Codice corso:
82915
Crediti formativi:
4
Ambiti:
BIO/18
Decreto Ministeriale:
509/99
Ore di lezione:
32
Lingua di insegnamento:
Italiano

ModalitÓ

La prova di esame Ŕ un colloquio orale con domande su tutti gli argomenti trattati durante il corso

Prerequisiti

Considerati i contenuti del corso si presuppone che gli studenti abbiano giÓ sostenuto gli esami di Genetica, Biologia Molecolare e Biochimica. Vicerversa non saranno in grado di comprendere adeguatamente gli argomenti trattati in questo corso.

Programma

Le tecnologie del DNA ricombinante: dalla genetica batterica e dei batteriofagi all’ingegneria genetica. Il ruolo dei plasmidi e il loro contributo alla nascita della genetica molecolare. Il concetto di vettore e l’evoluzione dei sistemi ospite/vettore. Enzimologia del DNA ricombinante. Sistemi di restrizione. Endonucleasi di restrizione convenzionali e non. Elettroforesi. Ligasi e saldatura del DNA invitro. Vettori per la costruzione di genoteche: plasmidi, fasmidi, batteriofagi, cosmidi, PAC, BAC e YAC. Problematiche della costruzione di genoteche. Metodi per l’analisi e la selezione di cloni. Genoteche genomiche e analisi dei genomi. Sintesi di cDNA e genoteche di cDNA: differenze rispetto alle genoteche genomiche. Ottimizzazione delle genoteche di cDNA. Sintesi chimica di DNA e di oligonucleotidi. Sequenziamento di DNA: metodo del dideossi e nuove tecnologie (pyrosequencing e Sequence By Synthesis). PCR, principi e utilizzi. Cenni sulla PCR quantitativa con tecnologia Real Time (SYBR Green e Sonde). Tecniche per la mutagenesi sito-specifica. Vettori e sistemi di espressione. Problematiche per la produzione ottimale di proteine in sistemi eterologhi. Vettori d'espressione di E. coli. Sistemi di espressione in lievito e in cellule d’insetto (Baculovirus e Bacmidi).

Bibliografia

TESTO PRINCIPALE
Primrose S, Twyman R Old B (2004) INGEGNERIA GENETICA, Principi e Tecniche. Zanichelli.

ALTRO TESTO
Brown TA. Biotecnologie Molecolari (2007). Zanichelli.


Elenco appelli e prove

Nessuna prova presente

Credits: apnetwork.it